目 的

靈長類獸（shòu）醫協（xié）會（APV，Association of Primate Veterinarians）意識（shí）到在非人類靈長（zhǎng）類動物（NHP，Non-human primate）中，腦脊液（yè）（CSF，Cerebro-Spinal Fluid）的（de）采集可能對（duì）於臨床和（hé）生物醫學研究都是必需的。由於這項技術存在固有風險，實驗動物獸醫應確定腦脊（jǐ）液采集對臨床評估的必要性和（hé）實用性（xìng）。為了生物醫學研（yán）究目的而進行腦脊液采集須在動物護理和使用委員會（huì）（IACUC，Institutional Animal Care and Use Committee）或等同的監管機構（gòu）批準下進行。以下建議為IACUC、使用非人類靈長類動物（wù）模型的研究人（rén）員以及獸醫人（rén）員提供基本（běn）信息，以供在製定（dìng）腦脊液采集相關（guān）的政策和標準操作程序（SOP，Standard Operating Procedure）時予以考慮。

背（bèi） 景

腦脊（jǐ）液分析（xī）是一種強大的工具，可加強對中樞神經係統內發生（shēng）的各種過程的（de）檢測，例如：出血、炎症、感染、腫（zhǒng）瘤和（hé）其他臨床情況。此外，對腦脊液中化合物（如激素、藥物、神經遞質、生物標誌物、代謝產物和（hé）病毒（dú））進行係列評估，在基礎研究和轉化研究中同樣非（fēi）常重要。中樞（shū）神（shén）經係（xì）統中的腦脊液體積可通過腦脊液的分泌和吸收而維（wéi）持（chí）穩定。

操作注意事項

腦脊液（yè）通常（cháng）通過腦池或（huò）腰椎間（jiān）隙穿刺（cì）采集。其中，通過腰椎穿刺采集腦脊液的並發症風險相對較低（dī）。因（yīn）為在大多數非人類靈長類動（dòng）物中，腰椎穿刺位點遠離脊髓的末端。應適當麻醉動（dòng）物，並使用無菌技術進（jìn）行（háng）操作，包括剃毛等術部準備和無菌材料的使用（yòng）。至少需使用無菌手套、注射器和針（zhēn）頭，還可考慮使用無菌手術創巾。腦脊（jǐ）液采集通常（cháng）以（yǐ）側臥位、胸骨臥位或坐位進行，分別通過（guò）頸部或脊柱的屈曲來改善對腦池的進入（rù）或擴大椎間隙（Gereschlager，1987；Magden，2015；Wolf，2012）。選（xuǎn）擇的針頭尺寸和長（zhǎng）度應適合非人類靈長類動物（wù）的種屬和體型（Brady，2000；Cereschlager，1987；Magden，2015；Wolf，2012）。操作時使用的技術、設備和耗（hào）材（cái），以及圍（wéi）手術期的護理因動物種屬、研究目的和臨床獸醫的偏好而不同。

有些研究方案可能需隨時間推移而連續采集腦脊液，或需采集未麻醉的受試對象的（de）腦脊液樣本。對於這些方案，可（kě）通過長期植入的腦脊液穿刺導管從清醒狀態的（de）恒河猴身上連續采（cǎi）集腦脊液，而該導管可連接至皮下的采集接入口（Gilberto，2003；Gilberto，2022；MacAllister， 2016）。

在編寫本文件時，作者盡一切努力尋找總腦脊液體積的數值、硬腦膜穿刺的次數限製或建議、采集頻率、安全（quán）的抽取體積以及腦脊液補充（chōng）速率相關的最新參考文獻。對於大多數靈長類動物，這方（fāng）麵的文獻很有限。此外，采集方法也各不相同，因為從靈長類獸醫協會成（chéng）員收集的調查結果表明，各機（jī）構均可成功地使用多種不同的方法采集腦脊液。因（yīn）此，作者根據現有的最佳（jiā）證據提供了（le）腦脊液采集的考慮因素和建（jiàn）議。

作（zuò）為參考，先前的研（yán）究已確定成年雄性（xìng）恒河（hé）猴（8.0-10.6kg）的表（biǎo）觀腦脊液體積為10+/-0.06 mL，腦脊液流速為0.018+/-0.003 mL/min（McCully，2020）。恒河猴的腦（nǎo）脊液形成速率範圍為28.6-44.2 μL/min（Curran，1970；Lux，1975；Martins，1977）。在這方麵（miàn）需要對非人靈長類動物進（jìn）行進一步的研究，以促進（jìn）更具指導性建議的（de）製定。

潛在不良反應

雖然在非人類靈（líng）長類動物中進（jìn）行腦脊液（yè）采集時報道的並發症很少，但解（jiě）剖變異（yì）以（yǐ）及不適當或技術不佳的操作方法（fǎ）可能導致樣本受損或並發症，如出血，腦疝，感染，腦幹、脊髓或神經根損（sǔn）傷以及動物的不適（shì）。這些並發症雖然罕（hǎn）見（jiàn），但可能會損害動物福利。

由於存在風險，應由獸醫或經過培訓的獸醫人員采集腦脊液。對於未成功的腦脊液采集嚐試，實（shí）踐可能有所不同。常見做法是允許一個人進行（háng）最多三次未成功的嚐試。在第三次嚐（cháng）試失敗後，應由另（lìng）一位合（hé）格的人員接替。如果第二（èr）個人在三次嚐試（shì）後仍無法采集到腦脊（jǐ）液，則停止嚐試。同時動物將接受適當的鎮痛治療，並從麻（má）醉中恢複。在嚐試（shì）失敗後更換采集部（bù）位（例如從（cóng）腦池到腰椎）通常可成功。如果是未進行成像的失敗嚐試，則可使用X線（xiàn）透視輔助穿（chuān）刺針放置。除提高成功率外，影像引導還可降低（dī）創傷（shāng）性穿刺的發（fā）生（shēng）率。（Eskey，2001）

術（shù）後監測應持續進行，直到動物返回其籠內，並能在沒有支撐的情況（kuàng）下保持直立姿勢（shì）。對（duì）動物的監測應該至少（shǎo）持續24小（xiǎo）時或根（gēn）據IACUC批準的方案進行。監測應包括對基本的生理、行為和運動參數的評（píng）估。尤其應評估動物是否出現神經功能障礙的跡象，包括但不限於嗜（shì）睡、抑（yì）鬱、昏迷和頭部壓迫感等。在人（rén）類醫學中，腦脊液采集後出現的頭痛和由此引起的（de）顱內低壓並不少見（jiàn）。考慮到非人類靈長類動物中的這種（zhǒng）潛在後遺症，應在手術時給予鎮痛治療（liáo），並延長2-3天，或根據與頭痛或脊柱疼痛相關行為的術後觀察結果按需（xū）提供鎮痛治（zhì）療。最有（yǒu）效（xiào）的鎮痛方案可能是術前即開始綜合治療（liáo）。

IACUC注意事項和記錄保存

IACUC應了解腦脊液采集的相關工作（zuò）以及（jí）所有可（kě）能的並發症（zhèng），並至（zhì）少每年對其審（shěn）查（chá）。所有相關信息（xī），如（rú）藥物劑量、術前準備、采集的腦脊液體（tǐ）積、采集頻率以（yǐ）及術後短期（qī）和長期恢（huī）複情況，均應在（zài）IACUC方案中進行描述，並（bìng）在醫療記錄或實（shí）驗室日誌中適當地記錄（lù）。

腦脊液可能是研究方案中的關鍵資料，但如果采集技術不恰當，可（kě）能（néng）會（huì）對（duì）動物福利產生影響。遞交方案時，應提供采集次數和頻率（lǜ）的科學依（yī）據。具體而言，IACUC還應仔細評估涉（shè）及腦脊液采集的每個提案，並考慮以下問題：

1.腦脊（jǐ）液采集是否對實（shí）現方案中所述的科（kē）學（xué）目標至（zhì）關重要？

2.是否有替（tì）代方法和侵入性較小的中樞神經係統評價方法（如成像技術）可供選擇，如果有，是否考慮過？

3.操作人員是否接受過適當的培訓並具備足夠的技能？

4.是（shì）否將提供（gòng）適當的（de）圍（wéi）手術期（qī）麻醉和鎮痛方案？有關麻醉和鎮痛計（jì）劃，應谘詢實驗動物獸醫。

5.采集的腦脊液體積是否符合動物（wù）的年齡和體型考慮？

6.腦膜穿刺（cì）的（de）次數和頻率是否適合動（dòng）物，以及（jí）並發（fā）症風險是否已降到最低？如果多次采集腦脊液為研究的（de）一部分，應明確規定每（měi）隻動物的最大采集次數。

7.術後監測計劃是否適當？

8.是否考慮了（le）所（suǒ）有可能（néng）的術後並發症，並列出（chū）了所有合理的幹預方法，包括安樂死？

原文：

Association of Primate Veterinarian :Guidelines for Cerebrospinal Fluid Aspiration for Nonhuman Primates in Biomedical Research.