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 來源: 日期:2025.02.25 

實驗大小鼠食物和飲水的限(xiàn)製

背(bèi)景

實驗大小鼠通常可以自由(yóu)采食和飲水。然而,在行為學、代謝學或胃腸道研究中,適當的食物(wù)或水分的(de)限製往往是實(shí)驗實施所(suǒ)必需的(de)。盡管如此,即使在實施此類限製措施時,也必須確(què)保動(dòng)物的健康狀況(kuàng),避免其承(chéng)受不必要的痛(tòng)苦與壓力。

不同物種對食物或水分限製下的(de)生理反應存在差異,因此實驗(yàn)設(shè)計需充分考慮這些特性。齧齒動物主要在(zài)暗周期內攝取大(dà)部分日常食物和水分,因此“過(guò)夜”禁食通(tōng)常等同於24小時禁食。此外,相較於食物限製,大小鼠對12至24小時甚至更長時間的水分限製具有更高的耐受性。

與其他物種(zhǒng)相比,小鼠(shǔ)和大鼠的胃腸道排空(kōng)速度較快:小鼠的胃排空時間約為3.5小(xiǎo)時,腸道排空時(shí)間約為6小(xiǎo)時;而大鼠的胃排空時間約為2.5小時,腸道排空時間約為4小時。因此,在進(jìn)行胃腸道研究或需要在灌胃前清空胃部內容物的實驗設計中,應充分考慮這些特(tè)性,以確(què)保實驗的準確(què)與可重複性。

定義

食物限製:動物連續4小時或以上(shàng)無(wú)法獲得食物。

飲水限製:動物連續4小時或以上(shàng)無法獲得飲水。

政策(cè)

當大小鼠被從飼養架取出並運輸到動(dòng)物設施的操作室或外部實驗室時,尤其是如果它們從自動飲(yǐn)水係統中移除(chú)超過4小時(shí)(對(duì)於小鼠)或6小時(對於大(dà)鼠),則必須提供水源(水瓶或補水凝膠(jiāo))。

當使用短期食(shí)物限製以(yǐ)空腹進行灌胃時,應(yīng)充分考慮胃排空時間,小鼠禁食(shí)超過4小時和大鼠禁食超過(guò)6小(xiǎo)時的情況必須有充分的科學依(yī)據,並獲得IACUC的批準。需要解釋所提方案對於該(gāi)物種和實驗的適用性。如果食物或飲水(shuǐ)的限製是為了用於行為學研究,在可以(yǐ)到達(dá)預期行為(wéi)學結果基礎上,將限製(zhì)程度降到最低。在提出食物或飲水限製方案之前,應(yīng)充分考慮正向強化(huà)的(de)方法,例如使用誘人的食物或飲水“獎勵”的激勵行為。在(zài)初期訓練階段之後,可能需要程度較輕的(de)飲食或水限製,並相(xiàng)應地調整限製(zhì)程(chéng)度。每當動物通過食(shí)物或水“獎勵”獲得(dé)其飲食(shí)的一部分時,通過食物(wù)或(huò)飲水“獎勵”獲得(dé)的食物(wù)和水的總量加上自由進食(shí)獲得的食物和水的總量必須足以(yǐ)維持動物的健康狀態,而不會導致動物顯著的體重下降。根據2013年NIH《行為研究飲食控製指(zhǐ)南》(Guidelines for Diet Control In Behavioral Research Studies),如果動物表現出脫水的症狀,包括但不限於皮(pí)膚彈性下降或眼窩凹陷,則必須通知獸醫服(fú)務部門。除非(fēi)另有IACUC批準,如果(guǒ)動物在限食或限水期間體重下降20%,必(bì)須立即增加攝取量,直到體重恢複,在動物使用方案中必須詳細說明這一計劃。在幼齡動物進行研究時,應特別關注其正常生長對飲食的需求。許多齧齒類實驗動物的正常生長曲線已經發表,在製(zhì)定幼齡動物的食物或水限製計劃時應參考這些(xiē)生長曲線(xiàn)。

當不提供自由采食的食物或水時(shí),則應(yīng)允許動物在行為訓練期間獲得足夠的食物和水,或者每天適當補充其攝入量。在行為訓練和/或補充期間,應同時提供食物和水,以(yǐ)盡量減少因脫水引起(qǐ)的厭食症。在需要補充的情況下,每日提供的(de)食物和飲水(shuǐ)的量應等同於動物在自由采食條件下通常消耗的量,或(huò)在實驗需(xū)要的情況下輕度限製的量(如消耗量(liàng)的80%),並得到(dào)IACUC的特別批準。必須獲得限製前的數據以確定適當的限製量,或提供參考範圍給IACUC。除非在IACUC方案中另有說明,否則從自由采食過渡到食物或飲水的限製應(yīng)逐步進行,持續一到多天,以盡量減少動(dòng)物的壓力。當(dāng)食物或飲水的獲取時間受到限製時,應在動物光/暗周期中的一致時間(jiān)提供,以使(shǐ)行為適應研(yán)究(jiū)時間表(biǎo)。

當食物和水用(yòng)作行為(wéi)激勵時必須在IACUC方案中說明(míng)其類型和(hé)濃度(如適用)。食物和飲水獎(jiǎng)勵物品應盡量減少(shǎo)向SPF動物引入病原的風險,優先選擇經(jīng)過(guò)輻照或高壓滅菌處理,專用於齧齒類行為獎勵的食物。如(rú)果使用未經輻照或高壓滅菌處理的食物,必須在在(zài)IACUC方案(àn)中提供充分的理由(yóu)。如果動(dòng)物的大部分日常(cháng)食物攝入發生在行為測試期間,則(zé)應選擇營養均衡的齧齒(chǐ)類動物食物。

每隻受到(dào)食物或飲(yǐn)水限製的動物必須由訓練有素和有經驗(yàn)的研究人員(yuán)至少每天觀察和稱重一次。每(měi)日體重和攝(shè)食記錄必須保持,並隨時提供給獸醫服務部門和IACUC審查。所有食物或飲水的限製方案都應明確說明如何監測動物的(de)健(jiàn)康狀況,並包括幹預標準(zhǔn),如體重減輕、身體狀況下降和/或脫水的臨床症狀。

小結

在實驗研(yán)究中,適當的食物與飲水限製(zhì)可為行為學、代謝學、胃腸道、藥理學和生理學研究提供關鍵的(de)數據和重要的見(jiàn)解。然而(ér),在實(shí)施限製時,必須確保動物的健康與福(fú)利不受影響。通過科學(xué)設計、嚴格檢測(cè)和倫理(lǐ)審查,研究人員(yuán)可(kě)以在確保實驗準確性的同時,最大程(chéng)度地減少對動物的(de)負(fù)麵影(yǐng)響。

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