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 來源:實驗動物那些事兒 日期:2024.05.14 

小(xiǎo)鼠麻醉指導原則

目的

本文是由ARC獸醫人(rén)員設計的小鼠麻(má)醉指導原則,旨在提供一般建議。這並不意(yì)味(wèi)著它包含了適(shì)用於小鼠的所有可能藥(yào)物(wù)組合的(de)詳盡列(liè)表。具體的(de)麻(má)醉方案應根據特定情況和研究需(xū)求與所在機構的獸醫合作製定。

麻醉是使動物完全或部分失去感覺,伴(bàn)隨或不伴隨(suí)意識喪(sàng)失。動(dòng)物可能需要麻醉進行手術、可能引起疼痛的非手術操作,或需要固定的非疼痛操作。在麻醉前、麻醉過程中和麻醉後,必須采取措施確保動物的安全和麻醉的有效性。

麻醉可通(tōng)過胃腸外給藥(yào)或吸入給藥的方式進行。藥物的選擇取決於(yú)具體操作、研究目的和其他因素,如動物的年齡。對於新生小鼠,有些特(tè)別考慮下文(wén)進行了概述。如(rú)對藥物選擇(zé)有疑問,請谘詢所在機構的獸醫。

01、麻醉(zuì)的一般指導原則和注意事項

適應期:建議所有動物在運輸後(hòu)適應一周,以防止應激引起的反應。動物至少需要72小時才(cái)能恢複到基本生理狀態。

禁食:由於小鼠無法嘔吐,通(tōng)常麻醉前無需禁食。然而,如需禁食(例如為了保持體重),因小鼠的(de)高代謝(xiè)率(lǜ),禁食時(shí)間不(bú)應超過2-3小時。請注意,切勿限製飲水。

眼睛保護:在麻(má)醉狀態下(xià),小鼠的眼睛會持續睜開,可能導致(zhì)角膜幹燥和損傷。因此,在(zài)如下條件下,應塗抹眼(yǎn)膏(如Puralube® 或 Lacrilube®)來保護眼睛。

麻醉持續時間(jiān)超過 5 min;

通(tōng)過麵罩進行麻醉。

監護:無論使用(yòng)何種麻醉劑,均應監測麻醉狀態(tài)下的小(xiǎo)鼠,以確保心髒和呼吸功能不被過度抑製,以及麻醉深度適(shì)當。

在沒(méi)有(yǒu)專用設備的情況下(xià),可以監(jiān)測以下麻醉小鼠的參數:

麻醉(zuì)深度:通過掐指檢(jiǎn)查(chá);

呼吸頻率和模式:正常未受(shòu)幹擾的呼吸率約為 180 bpm,麻醉期間可接受 50% 的緩慢下降速率;

粘(zhān)膜顏色:應為粉紅色而非藍色或灰色;

體(tǐ)溫:可使用直腸溫度計監測體溫,體溫應保持在 36℃ 以上;

血氧飽和度和心率:可(kě)用專(zhuān)用的齧齒類動物脈搏(bó)式血氧儀監(jiān)測血氧飽(bǎo)和度 (> 95%) 和心率(300-800 bpm);

如對監(jiān)護或監護設備有任何問(wèn)題,請與所在機(jī)構的獸醫聯係。

保溫:所有種屬在麻醉狀態下均存在低體(tǐ)溫的風險。小(xiǎo)鼠由於體表麵積與體(tǐ)重比高(gāo),尤其容(róng)易受到影響。低體溫對動物會產生顯著的生理應(yīng)激,可能延長恢複時間並有潛在致(zhì)命風險。

在(zài)所有麻醉過程中提供額外的保溫措施。

補充(chōng)熱源包括循環水毯、電熱墊和可在微(wēi)波或水浴中加熱的市售產品(如等溫墊或凝膠加熱器)。

切勿直接將動物放在熱源(yuán)上。

如對使用或購買額外的保(bǎo)溫來源有疑問,請(qǐng)與您所在(zài)機(jī)構的獸醫聯係。

補液:在麻醉時間較長(zhǎng)或(huò)動物患病(bìng)、老年或虛弱的情況下,考慮腹腔或皮下注射溫(wēn)熱的液體。更多(duō)信息請谘詢您的獸醫。

恢複:持續監測動物直至其完全恢(huī)複。

在幹淨的籠子裏,將動物放在紙巾上(不使用墊料)。這樣可以最大程度地減少氣管(guǎn)阻塞或肺炎的風險。

麻醉後的動(dòng)物單獨放在(zài)一個籠子裏進行恢複。

恢複期間繼續(xù)提供額外的保溫(wēn)。

當(dāng)動物能夠走動時,將其送回原籠中子,並提供飼料和水。

根據所進行的手術,為(wéi)了避免同籠夥伴啃縫線或切口處的創傷,小鼠可能需要(yào)在術後階段單獨飼養。任何單獨飼養的計劃都應包括在IACUC方案中(zhōng),以便進(jìn)行審查和批準(zhǔn)。

02、麻醉藥物和程序

吸入麻(má)醉劑: 異氟烷是首選的吸(xī)入麻醉劑。 起效快、恢複可靠。

A. 吸入(rù)麻醉可以通過滴瓶法、誘導室、麵罩或氣管插管使用精密蒸汽器進行。

i.滴瓶(píng)法:

a.請勿使小鼠直接接觸液體(tǐ)吸入麻醉劑(可通過在棉花或紗布上放置不可滲透(tòu)的網格來實現)。

b. 由於無法控製(zhì)室內的麻醉劑濃度,並(bìng)且濃度可能迅速達(dá)到有毒水(shuǐ)平,因此該方法僅適用於(yú)非常短的手(shǒu)術,如尾部活檢、皮下腫瘤植入或麵罩麻醉前(qián)的誘導。

ii.誘導室、麵罩和氣管插管:

a.這些需要配備氧氣源和精密蒸發器的氣體麻醉機(jī)。一些研究單(dān)位可能使用室內空氣而不是純氧作為氣源,這(zhè)也是可接(jiē)受的(de)。

b.蒸發器必須與特定的吸入麻(má)醉劑兼容。

c.由(yóu)於小鼠呼吸能力較小,使用非循環呼吸係統。

iii. 當使用吸入性麻醉時,使用通風櫃或配(pèi)備氣體清除係統的麻醉係統,以盡量減(jiǎn)少職(zhí)業暴露於排出氣體。

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B. 注射麻醉劑:氯胺酮(tóng)/賽(sài)拉嗪(qín)聯合使(shǐ)用是小鼠的首選(xuǎn)注射麻醉劑。

下麵列出了其他常用的注射劑。

i. 小鼠對各種麻醉藥的敏感性差異顯著。 年齡、體質、品(pǐn)係、健康(kāng)狀況、基因調控和性別等因素都可能影響麻醉敏感性。以下劑量僅為一般指導原(yuán)則,基於上述因素可能存在顯著差異。在您的方案中添(tiān)加麻醉劑時,建議(yì)提供一個範圍,以允許根據每隻動物的特定需求進行給(gěi)藥。

ii. 不建議在(zài)小鼠中進行肌肉注射(IM),因為可能導致組織刺激(jī)、跛行和自殘等(děng)並發症。

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*一(yī)個很好的初始方案是 100 mg/kg 氯(lǜ)胺酮和 7 mg/kg 塞拉(lā)嗪。

**阿替美唑(5 mg/mL)是右美托咪定(0.5 mg/mL)濃度的 10 倍。

您需要 4-6 倍於右美托咪定體積的(de)阿替美唑(5 mg/mL)來逆轉(zhuǎn)右美托咪(mī)定。然而,阿替(tì)美唑的安全範圍非常高,因此如(rú)果逆轉非常緊急,給(gěi)予右美托咪定等體積的阿替美唑,可使阿替美唑的劑量增加 10 倍,這是安全的。

同樣,使用與塞拉嗪(20 mg/mL)等體積的阿替美唑 (5 mg/mL) 逆轉(zhuǎn)也有效。雖然塞拉嗪具有(yǒu)更(gèng)高的濃度(20 mg/mL),但阿替美(měi)唑(zuò)(5 mg/mL)更純淨,且與α2 受體結(jié)合更緊密(mì),因此(cǐ)等體積逆轉(zhuǎn)塞拉嗪也可行。

C. 注射麻醉劑的一種類型是局部麻(má)醉劑。

i. 局麻藥通過特異(yì)性結合(hé)神經細胞膜上的電壓門控 Na + 通道來阻斷神經衝動。

ii. 給藥途徑包(bāo)括粘膜(mó)(鼻、眼等)局部(bù)給藥或直接注射(shè)到組織和神(shén)經(jīng)束周圍。

iii. 在疼痛刺激(如切口)之(zhī)前給予局部麻醉劑被認為(wéi)是輔助鎮痛藥物,與阿片類和 非甾體抗炎(yán)藥(yào)(NSAID)一(yī)起使用。

iv. 由於持續時間較短(數小時),不鼓勵將局(jú)部麻醉劑作為(wéi)主要鎮痛藥物使用,

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03、對小鼠麻醉的特殊考慮:仔鼠麻醉

目前文獻中描述了幾種適(shì)用於(yú)新生(shēng)齧齒動物的麻醉方(fāng)法,包括注射麻醉、吸入麻醉和低溫麻醉。 

新生齧齒動物的麻醉會導(dǎo)致(zhì)親代啃食後代的(de)問題。可通過確保新生仔鼠完全恢複後再歸(guī)還給母鼠來減少這種(zhǒng)情況。其他措施包括讓幼仔接觸來(lái)自於母鼠籠中的汙染墊料,並將(jiāng)幼仔放在窩仔中間位(wèi)置。

低溫麻醉

低溫麻醉隻適用於7日齡以下的新生齧齒動物,並且不應用於持續時間超過30分鍾的手術。

動物不應直接置於冰上(在(zài)動物和底(dǐ)層(céng)冰(bīng)浴之間使用乳膠手套或其他物質)。

當足部反射消失時,動物已(yǐ)達到適當的麻醉水平。

手術過程中請勿(wù)使用白熾燈,因為(wéi)它會(huì)使手術區域變熱,導致動物從手術麻醉狀態中蘇醒。

麻醉後,動物應緩慢複溫。快速升溫可能會導致(zhì)組(zǔ)織損傷。可使用循環水毯、加熱(rè)墊 (40℃) 或培養箱 (33℃) 中給動物重(chóng)新升溫。

幼仔能夠在無直接物(wù)理(lǐ)刺激的情況下移動後,可將其歸還給母鼠。

吸入麻(má)醉

新生齧齒動物可能比成年齧齒動物需要更長的(de)吸入麻醉誘導時間。

在麻醉盒中進行誘導通常需 5% 異氟烷,維持(麻醉誘導盒或鼻錐)需 1-2%(流速 = 0.3-0.6 L/min)。

注射麻醉

氯胺酮(tóng)/塞拉嗪是 7 日(rì)齡以上小(xiǎo)鼠的推薦注射麻醉劑(jì):通過 27g 針頭 IP 注射 50-150 mg/kg 氯胺酮和 5-10 mg/kg 塞拉嗪(qín)(最大體積(jī) = 0.5 mL)。

對(duì)於7日齡以上的小鼠,推薦使用氯胺酮/塞(sāi)拉嗪作為注射麻(má)醉劑:使用27g針頭腹腔注射50-150 mg/kg氯胺酮和5-10 mg/kg塞拉嗪(qín)(最大(dà)體積=0.5 ml)。

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