血生化檢測（cè）

我們在（zài）前文《齧齒動物血生化項目分析（上）》中介紹了齧齒動物的蛋白質與肝膽功能指標以及腎髒功能指標的（de）檢測（cè）意義（yì）。本文我（wǒ）們將繼續對齧齒動物的脂（zhī）質代謝、胰（yí）腺功（gōng）能、糖代謝等相關常見血生化指標進行介紹。

脂代謝檢測

脂質的運輸對機體內（nèi）細胞功能、代謝等起著至關重要的作用，此外它還對組織起著保護作用（yòng），也作為生物體（tǐ）最重要的能量來源之一。由於脂質（zhì）具有很廣泛的（de）作用，因此其穩態也會隨著機體疾病等發生變化。

1.總（zǒng）膽固醇（Total cholesterol, TC）

血清總膽固醇指（zhǐ）血液中各（gè）脂蛋白所含膽固醇總和。齧齒類（lèi）動物的脂代謝指標與人類相比差異（yì）明顯。大小鼠體內的大（dà）部（bù）分膽固醇都以高（gāo）密度脂蛋白形式存在，且缺乏膽固醇酯（zhǐ）轉運蛋白（CETP）。膽固醇濃度的增加多見於動物內分泌、肝髒或腎髒疾病；降低則常見於（yú）動物營養不良等。

2.甘油三酯（Triglyceride, TG）

甘油三酯構成脂肪組織，參與TC合成以及血栓形（xíng）成。需（xū）要注意的是，小鼠的血脂（zhī）比較穩定，對抗高血脂的能（néng）力很強，甘油三酯不（bú）容易升高，尤其C57BL小鼠一般不（bú）適合單純用於高甘油三酯血症（zhèng）的造模。TG升高多見於動物過度肥胖、糖尿病等，而營養不良則是（shì）導致其降低的主要因素。

3.高密度脂蛋白（High-density lipoprotein, HDL）

高密度脂蛋白主要由肝髒和小腸合成，含有膽（dǎn）固醇、蛋白（bái）質和磷脂，但甘油三酯很少。 與人類和非人靈長類動物不同的是，大鼠體內的HDL濃度高於LDL（低密度脂蛋白膽固醇），這可能是由（yóu）於大鼠體內缺乏膽固醇酯轉運蛋白（CETP）所致（zhì）。

高密度脂蛋白（bái）可以清除體內膽固醇（chún），當HDL升高時（shí），並非病理表現，無需關（guān）注；當（dāng）動物出現動脈硬（yìng）化、糖尿病、慢性（xìng）腎衰時，HDL表現為降低，且老年動物更易（yì）出現降低情況。

4.低密度脂蛋白（Low-density lipoprotein, LDL）

低密度脂蛋白由極低密度（dù）脂蛋白轉化而來，含（hán）有豐富的蛋白質、少（shǎo）量的膽固醇和甘油三酯。因此，LDL出現降低的情況，提示動物機體血脂不高，可不予關注（zhù）；但當（dāng）LDL出現升高時，應該考慮甲狀腺功能低（dī）下、慢性腎衰（shuāi）等，尤其需要關（guān）注動脈粥樣硬化，LDL是發生動脈（mò）粥樣硬化的重要危險指標之一。

5.脂蛋白（Lipoprotein, Lip）

齧齒類動物（wù）會在肝髒和小腸中合成載脂蛋白（bái）（apoB-100和apoB-48），它們是血漿中運輸脂類的重要成分。血（xuè）漿中載脂蛋白（bái）水平上升，與糖尿（niào）病腎病、尿毒症等相關（guān）；肝髒疾病可（kě）使載脂蛋白水平下降。

6.遊離脂肪酸（Nonestesterified Fatty Acid, NEFA）

遊（yóu）離脂肪酸在肝髒（zāng）、脂肪和乳腺組（zǔ）織中合成。當動物長期使用高脂肪/低碳水（shuǐ）化合物的飼料時，會導致NEFA合成（chéng）減少；當動物患有伴（bàn）有脂肪（fáng）酶活（huó）性增高（gāo）的（de）高（gāo）血脂症時，會導致血漿中NEFA增加。

胰腺功能檢測

胰腺分為兩部分功能，一部分具有外分泌功能，這部分又（yòu）稱為胰腺（xiàn）腺泡，是胰腺最大的組成部分，用來評估胰腺胰泡功能的檢測包括澱粉酶和脂肪酶。另一部分具有內分泌功能，許多檢測都可用來評估胰腺的（de）內分泌功能，如傳統的血糖監測，以及果糖胺和糖化血紅蛋白等。

1.澱粉酶（Amylase）

澱粉酶分子量（liàng）較小，可被腎小球濾過，是尿液中唯一可見（jiàn）的血清酶。澱粉酶雖主要（yào）來（lái）源於胰腺，但唾液腺和小腸也（yě）可以產生。澱粉酶在大鼠和（hé）小鼠的唾液腺（xiàn）中的濃度高於其（qí）他實驗動物，因此大小鼠澱粉酶的增高也（yě）可以考慮涎腺疾病。

通常，血澱粉酶（méi）濃度升（shēng）高最常（cháng）見於急性胰腺（xiàn）炎，此外，慢性胰腺（xiàn）炎的複發期和胰管（guǎn）阻（zǔ）塞（sāi）也可致澱（diàn）粉酶（méi）升高。但是澱粉酶升高（gāo）的水平與胰（yí）腺炎（yán）的嚴重程度沒有直接的比例關係（xì）。由於澱粉酶可以（yǐ）經腎髒排泄，因此任何原因導致腎小球濾過率降低時，都可引起血清澱粉酶升高。

2.脂肪酶（méi）（Lipase）

脂肪酶（méi）是一組催化（huà）長鏈脂（zhī）肪酸甘油酯水解的酶。大（dà）多（duō）數血（xuè）清（qīng）脂肪酶來源於（yú）胰腺，少（shǎo）量來（lái）源於胃腸道黏（nián）膜。過量的脂肪酶經腎髒濾過，因（yīn）此在（zài）胰腺疾（jí）病早期（qī），脂肪酶仍處於正常水平，當（dāng）病情逐漸加重時，脂肪酶水平才出現升高趨勢。

在慢（màn）性進行性胰腺疾病中，受損的胰腺細胞會被結締組織取代，導致（zhì）不能產生相應的酶，因此澱粉酶和脂肪（fáng）酶會呈現漸進性降低。脂肪酶活性升高多見於腎髒和肝髒功能（néng）異常。此外，服用（yòng）類固醇（chún）藥物可引起脂肪酶升高，但對澱粉酶無影響。

糖代（dài）謝（xiè）檢測

1.葡萄糖（Glucose, Glu）

血糖的（de）水平可以用來評估（gū）胰腺功能，其（qí）調節機製比較複雜，除了胰島素分泌缺乏外，胰（yí）高血糖素、甲狀腺素、腎上腺（xiàn）素和糖皮質激素都可以使血糖升高；葡萄糖降低多見於營養（yǎng）不良、慢（màn）性貧血等。由於成熟紅細胞會利用葡萄糖提供能量（liàng），因此在使（shǐ）用血漿或者血清樣本時，應立（lì）即將血清或血漿與紅細（xì）胞分離，否則在室（shì）溫條件下，紅細胞會使樣本中血糖含量每小時下降10%。在檢測葡萄糖前，應對動物進行禁食，但（dàn）對於齧齒動物（wù）（尤其小鼠）來說，由於它們屬於夜間進（jìn）食（shí）動物，如果（guǒ）進行夜間禁食，其代謝消耗相當於靈長（zhǎng）類動物禁食24-48小時（肝髒糖原基本耗盡），因（yīn）此5-6小時（shí）禁食更適合小鼠。

2.糖化血紅（hóng）蛋白（Glycated hemoglobin, GHb）

糖化血紅（hóng）蛋白也稱為血紅蛋白A1C（HbA1c），是血紅蛋白與葡萄糖發生不可逆結合反應的產物。當機體發生高血糖時，血（xuè）紅蛋（dàn）白與（yǔ）葡萄糖結合增加，從而使糖化血紅蛋白升高，因（yīn）此糖（táng）化血紅蛋白可以直接反映機體血糖水平。糖化血紅蛋白反映的是紅細胞壽命（mìng）期間的平均血糖濃度，大鼠紅細胞（bāo）壽命約60天，小鼠紅細胞壽命約為35-50天。因（yīn）此和果糖胺相比，糖化血紅蛋白反映了更長時間內的血糖水平。但需要注意的是如果檢測是基於高效液相（xiàng）層析法原理，由於溶血性貧（pín）血動物（wù）的紅細胞壽命短，因此會導致糖化血紅蛋白結果（guǒ）出（chū）現假性降低。

3.果糖胺（Fructosamine）

果糖胺是葡萄糖與蛋白質（尤（yóu）其白蛋白）發生不可逆結合的產物。果糖胺（àn）升高表示動物持續存在高血糖；但動物發生低蛋白血症，其血清果糖胺水平會假性降低。

有研究表明，果糖胺可在臨床研究中，可作（zuò）為（wéi）糖尿病動物的血糖監測的有效指標。

其他

在臨床檢測中，還有一些生化項不針對任何器官或（huò）係統，但可以輔助提供一些診斷信（xìn）息，如（rú）乳酸脫氫酶、肌酸激酶等。

1.肌酸激酶（creatine kinase, CK）

許（xǔ）多組織中都含有肌酸（suān）激酶，胃腸道、腎髒、脾髒和胰腺（xiàn）中含有少量CK，而骨骼肌、心肌和大腦中含有大量CK。因此當骨骼肌、心肌受損時，CK會從細胞中滲出，導致血液中CK含量增加（jiā）。

由於任何損傷肌細胞膜的物質都可（kě）以導致血液中CK升高，在實（shí）際檢測時，可（kě）對CK同工酶檢測來進行區分損傷來源。CK有3中主要同工酶：CK-MB（心髒型）、CK-BB（腦型）、CK-MM（骨骼型）。比較特殊（shū）的是，在大鼠血（xuè）小板中，CK含量是紅細胞的（de）30倍，且目前僅發現存在（zài）CK-BB。

另外，肌內（nèi）注射、手術等導（dǎo）致肌肉損傷可引起CK升高；   EDTA、陽光直射或測（cè）定不及時可引（yǐn）起樣本中CK假性升高。

2.乳（rǔ）酸脫氫酶（lactate dehydrogenase, LDH）

乳酸脫氫酶是一種（zhǒng）催化乳酸轉化為丙（bǐng）酮酸的血清（qīng）酶。LDH一般不（bú）具（jù）有器官特異性，它來（lái）源廣泛，幾乎所有（yǒu）的組織中都含有LDH，但是物種間分（fèn）布具有差異。如大鼠骨骼肌中分布最多，其次是心肌（77%）和肝髒（41%）。

LDH的升高雖然多見於肝髒受損和肌肉損傷，但是它缺乏評價肝損傷的特異性和敏感性。因此在齧齒動物中（zhōng），LDH一般（bān）多用於檢測實驗性誘導心（xīn）肌損（sǔn）傷。為了提（tí）高（gāo）LDH測定心肌損（sǔn）傷的（de）特異性，也可以測定其同工（gōng）酶，即LDH1和（hé）LDH2。

需要注意的是，在常用的（de）實驗動物中，血小板、紅細胞、白細胞、肝髒（zāng）中（zhōng）都可（kě）能會表達LDH同工酶，因此肝損傷、溶血和凝血均會混（hún）淆心髒損傷的診斷。另外，感染乳酸脫氫酶增高病（bìng）毒（LDEV）的小鼠，血清中LDH含量可增（zēng）高3-5倍。

3.C-反應蛋白（C-reactive protein, CRP）

CRP是第一個在人類身上發現的急性期反應蛋白（Acute Phase Reaction Proteins，APR），目前CRP也被（bèi）認為是齧（niè）齒動物的APR蛋白，肝細胞是合成CRP的（de）主要部位。CRP的主要生物（wù）學功能是通過於（yú）配體（凋亡或壞死的細胞，或入侵（qīn）的細菌（jun1）、真菌、寄（jì）生蟲等的磷酰（xiān）膽（dǎn）堿）結合，激活補體和單（dān）核吞噬細胞係統，將帶有配體（tǐ）的病原體或病理性細胞清除。在齧（niè）齒動物體內，當炎症或創傷發生後6h內，CRP可迅速升高至上千倍，在疾病治愈後，其含量（liàng）急速下降。發生心髒病、敗血症和腫瘤等多種疾病，CRP都會急劇上升（shēng）。

比較特殊的是，健康大鼠體內（nèi）CRP值較（jiào）高，且CRP的水平與年齡（líng）相關並呈正比。在健康小鼠和豚鼠血清中，幾乎（hū）無法檢出CRP。在這兩種動物體內，CRP不作為急性期蛋白而發揮作用。特別是豚鼠，在正常狀態和急（jí）性期豚鼠血清（qīng）中，都無法檢出（chū）CRP，這主要（yào）是因為豚鼠CRP基因中缺乏適當的啟動子區域。