2023年7月1日實施的（de）GB14922-2022將金黃色葡萄球菌從SPF級齧齒動物和兔的“必檢項”調整為“必要時檢測項”，這讓實驗動物設（shè）施管理者（zhě）和獸醫們在製（zhì）定自己設施（shī）的監測項目清（qīng）單時有了（le）自由選擇的空間。那麽金（jīn）黃色葡萄球菌在實驗動（dòng）物（wù）中存在的可能性究竟有多（duō）少，對（duì）動物健康和研究（jiū）有哪些影響，是否要將其（qí）從自己設施的監測清單（dān）中刪除呢？本文將對金黃（huáng）色葡萄球菌的基本信（xìn）息進行（háng）整理介紹，為讀者朋友們提（tí）供參考依（yī）據。

病原學（xué）介紹

金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）隸屬葡萄球菌屬（Staphylococcus）葡萄（táo）球菌科（Staphylococcaceae），該屬（shǔ）除了最廣為人知的金黃（huáng）色葡萄球菌（jun1）外還包括木糖葡萄球菌（S.xylosus）、）、鬆鼠葡萄球菌（S. sciuri）、尼泊爾葡萄球菌（S. nepalensis）等二十餘種葡萄球菌。

葡萄球菌屬細菌是革蘭陽性球菌，大小約0.5~1.5μm，呈2~4個細菌（jun1）或無規則葡萄狀（zhuàng）排列（liè）、無動力、無芽孢、無鞭毛或形成有限的（de）莢膜。

流行病學

人、齧齒類動物、兔等多種動物都是金黃色葡萄（táo）球菌（jun1）的（de）天然宿主，主要通過直接接觸或間接接觸感染的動物、汙染物等傳播。在健康人群中（zhōng），金黃色葡萄球菌的檢出率約為25%。在實驗動物中，由於飼養、管（guǎn）理、種子質量等不同，不同的動物群體中檢出率會存（cún）在較大差異（yì）。

美國CharlesRiver統計從（cóng）2003-2020年（nián）該公司檢測實驗室接收的小鼠（shǔ）中金黃色葡萄球菌檢出率是2.2%(n=98979)，大鼠檢出（chū）率是23.6%(n=10413)。歐美幾個主（zhǔ）要（yào）實驗動物供應商的監測報告則顯示其小鼠金黃色葡萄球（qiú）菌檢出情況差別較大，甚至出現同一供應商不同設施或不同級別動物檢出率不同的情況。例如CharlesRiver北美和加拿大的無病毒（dú）抗體（VAF）小鼠中（zhōng）檢出率最高（gāo），達20.9%， JAX實驗室標準小鼠中則隻有0.8%，其他供應商不同微生（shēng）物等級（jí）小鼠的檢出率從（cóng）0到9.7%不等（表1）。歐洲的實驗動物設施則參考FELASA的要求，不報告SPF小鼠的金黃色葡萄球菌檢測情況。這些數（shù）據表明（míng），在世界範圍內常規SPF實驗小鼠和大鼠群體中金黃（huáng）色葡萄球菌都是普遍存在的（de）。不過由於免（miǎn）疫缺陷動物在感染金黃色葡萄球菌後更容易（yì）發展成有症狀的臨床疾病，因此國外主要（yào）供應商（shāng）無一例外的都在自己的免疫缺（quē）陷動物種群中都排除了該菌。詳（xiáng）見表1。

表1 歐美主要供應商不同（tóng）設施中小鼠金黃色葡（pú）萄球菌檢出率

注：a：屏障設施的（de）具體定義由各個供應商提供，詳細可參（cān）考其網站。SPF：無特定病原體，SOPF：無特定和機會性病原體，VAF：無病毒抗體。  b：數（shù）據收集於2016年11月。CharlesRiver，Janvier和（hé）Envigo累積數據18個月、JAX實驗室12個月， Taconic 6個月。  c：根據FELASA的建議未報告金黃色葡萄球菌。

西山生物2022年的檢測數據顯示：我國大鼠中金（jīn）黃色葡萄球菌有12.56%（n=1 154）的檢出率；而小鼠中檢出率較低，僅有0.28%（n=8 228）。此外，潘金（jīn）春等報告2013—2015年廣東省實驗小鼠的金黃色葡萄球菌檢出率為0.7%（n=858），實驗大（dà）鼠的金黃色葡萄球菌檢出率為2.9%（n=104）。這（zhè）些數據表明我國（guó）小鼠中金黃（huáng）色葡萄球菌感染率較低，但（dàn）大鼠則要（yào）高許多。

對從實驗小鼠（shǔ）和大鼠中分離到的金黃色葡萄球（qiú）菌進一步分型分析發現，C88型最常見，占54.5%，也有許（xǔ）多人類中常（cháng）見的株型，例如CC1, CC5, CC8, CC15, CC10，CC30等被檢出，合計占比為37.4%。考（kǎo）慮到一個世紀以來實驗小鼠（shǔ）和大鼠與人類（lèi）的密切接觸史，研究者們認為這些菌株最（zuì）初就是從人類傳播給（gěi）齧（niè）齒類動物的。但並不是所有適應人類的金黃色葡萄球菌都能（néng）在（zài）齧齒類群體中定（dìng）植。例如CC30和CC45在人（rén）類中是最常見的黃色（sè）葡萄球菌（jun1），但在小鼠中很少能檢測到，在大鼠中則幾乎完全不存在。相應的，大小鼠中最常（cháng）見的（de）C88也未見有感染（rǎn）動物設施內工作人員的報道。這說明金黃（huáng）色葡萄球菌從齧齒類動物傳播到人是不易發生的。

從（cóng）實（shí）驗室小鼠、大（dà）鼠中分離到的金黃（huáng）色葡萄球菌較少攜帶免疫逃避（bì）基因IEC及編碼人類特（tè）異性毒力因子的MGE基因，同時，由於實驗小（xiǎo）鼠中通常不會使用抗生素，細菌消除了保持（chí）抗藥性基（jī）因的壓力，因此小鼠金黃色葡萄球菌對青黴素的耐藥率低於人類菌株，且大多數小鼠和大鼠分離株缺乏氨苄西林耐藥性（xìng），這些（xiē）都顯（xiǎn）示（shì）這些菌株長（zhǎng）期適應了齧齒動物（wù）宿（xiǔ）主（zhǔ）。

在齧齒（chǐ）類實驗動物和人群中分離的金黃色葡萄球菌（jun1）的這些（xiē）差異提示，盡管金黃色葡萄球菌有從人傳播到實驗齧齒類動物的（de）風險，但是實驗動物中所流行的細菌主要來自動物群（qún）體內部。

臨床（chuáng）症狀

健康且（qiě）免疫功能（néng）健全的齧齒動物和兔的皮膚、黏膜或腸道中即（jí）使（shǐ）可以檢出金（jīn）黃色葡萄球菌但一般也都（dōu）是無症（zhèng）狀的，這種隱性感染占絕大（dà）多數（shù），這也是這（zhè）次國標修訂過程中將該菌從（cóng）必檢項調整為（wéi）必要時檢測項的主要原因之一。

在出現臨床症狀的齧齒類動物中，最（zuì）經常出現的症狀包括潰瘍性皮炎、創傷性皮炎、皮膚膿腫、包皮腺膿腫、子宮內膜炎等。出（chū）現臨床症狀的兔可表現為皮下膿腫、乳腺炎、足皮炎和敗血症等。

圖1 裸鼠葡萄球菌感染導致出現（xiàn）麵部膿腫、眼眶腫脹、皮屑

其他葡萄球菌

2023年1-6月，蘇州西山生物檢測部（bù）在（zài）對客戶（hù）送檢的出現皮屑、脫毛（máo）、皮膚腫脹、破潰、結膜炎等（děng）症狀的實驗小（xiǎo）鼠樣本的鑒定（dìng）檢測過程中發現，21份送檢樣本（běn）有（yǒu）20份是葡萄（táo）球菌感染引起。其中鬆鼠葡萄（táo）球菌陽性12例，木糖葡萄球（qiú）菌陽性11例，其次為緩慢葡萄球（qiú）菌（4例）、科氏葡萄球菌（3例（lì））、尼泊（bó）爾葡萄球菌（2例）、頭（tóu）葡萄球菌（1例（lì））和金黃（huáng）色葡萄球菌（1例），見圖2。這說明，目前在臨床上，金黃色葡萄球菌不應是我們唯一關（guān）注的葡萄球菌，多種葡（pú）萄球菌都可能感染齧齒類實驗動（dòng）物並可能發展為有症狀的感染性疾病，其中（zhōng）小部（bù）分會（huì）造成動物群體大規模發病。CharlesRiver 2003-2020年（nián）的檢測數據也顯示，小鼠相關樣本的PCR檢測（cè）中（zhōng）發（fā）現了（le）木糖葡萄（táo）球菌有高達51.8%（n=1426）的檢出。木糖葡萄球菌（jun1）、鬆鼠葡萄球菌等定植並導致（zhì）齧齒類實驗動物出現皮膚病變也多有報道。因此實驗動物（wù）在出現疑似傳染（rǎn）性臨床疾病後應及時檢（jiǎn）測鑒定，如（rú）果是由於葡萄球菌感染導（dǎo）致，應（yīng）對這些菌（jun1）株做進一步分析確認其（qí）株型，對那些已經確（què）認（rèn）的高毒力株型或已經造成大量動物發病（bìng）的，應積極采取措施，將其徹（chè）底從自己的設施中清除。

圖2.葡萄球菌在小鼠皮膚感染病例中檢出情況

檢測

目前采用較多的檢測（cè）方法為細菌分離培養法以及（jí）生化鑒定。同時，PCR方（fāng）法（fǎ）進（jìn）行核酸（suān）檢測也被（bèi）越來越廣泛地應用（yòng）於篩查檢測和分型檢測。此外，MALDI-TOF MS質譜法直接對微生物的蛋白質混（hún）合物進行分析，能夠快速鑒定菌種，也是（shì）目前臨床上常用的鑒定方法。

圖3.葡（pú）萄球菌在血瓊脂平板上（shàng）的菌（jun1）落形態

預防和控製

在原來沒有（yǒu）金（jīn）黃色葡萄球菌的屏障設施中，後（hòu）期可能會通過一些偶然因素導致細菌的（de）引入，從Charles River五個屏障設施的回顧性數據顯示，一個金黃色葡萄球菌（jun1）陰性屏障設施要10個月到4年的時間才可能變為（wéi）陽性，一旦引入，如果不（bú）加以監測排除（chú），則細菌會很容易長（zhǎng）期定植並穩定傳播給後代，但是在不同籠子之間的傳播效率則是不一定的。可以肯定的是獨立通風籠具的使用、良好的衛生措施和規範的飼養管理操作可以有效阻斷傳播，降低感染率。

因（yīn）此對於那些決定要將金黃色葡萄球菌保（bǎo）留在自己的監（jiān）測清單的設施而言，就（jiù）需要對引入的動（dòng）物和維持的動物進行監測並及時剔除感染動物，同時加強工作人員個人防護措施，還需加強對環境的清潔（jié）和消毒。金黃色葡萄球菌對多數（shù）消毒劑都敏感，但是（shì）對幹燥環境有抗性。

對（duì）研究（jiū）的影響

大多數情（qíng）況（kuàng）下，金黃色葡萄球菌感（gǎn）染不會影響研究，這是本次國（guó）標修訂將該菌從（cóng）必檢項調整為必要時檢（jiǎn）測項的另一主要原（yuán）因。不過金黃色葡萄球菌的（de）定植啟動了小鼠免疫係統，誘導了許多對金黃色（sè）葡萄球菌蛋白特異性的IgG免疫應答，這將影響葡萄球菌相關（guān）的感染（rǎn）實（shí）驗和疫苗（miáo）研究，因此做這類研（yán）究時還（hái）是應使用不攜帶該菌的動物。

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